字子固,山东省日照县夹仓一村人。1905年出生,系中将尹作翰的堂弟。早年毕业于县立中学,1924年入南昌陆军士官教导团学习。1925年4月,学习结业后,在江西陆军第一师当差遣员。1927年7月,任孙传芳部第四师十三团特务连排长,后为该团旗官。1928年至1931年,任第三军团第九师上尉作战参谋、四十七师一团一旅上尉作战参谋、一四○旅团少校团副、四十三师一旅三团一营少校营长。1932年,经十八军副军长刘绍先介绍加入国民党,同年任党部执行委员兼十八军军事教导大队第六队队长。后于1933年和1934年的两个夏天参加庐山训练班和陆军大学十三期学习,补黄埔六期学籍。1937年至1938年,任十八军情报科科长、六十八团少校团长、二十一旅副旅长、三十一旅上校旅长兼徽州戒严司令。1941年至1947年,任第九师参谋长、六十五师副师长兼十五军干训班教育长等职,曾去印度蓝姆伽美国陆军战术学校受训。1947年,任第九师师长,后兼南阳夏令营军事训导官。1948年9月2日,任第二军少将副军长,同时兼任宜昌地区警备司令。抗日战争时期,为维护民族利益,他勇敢抗日。1937年起与共产党人胡兰畦等人及一些进步民主人士多有联系。抗战胜利后对南京政府日渐失去信心,几曾率部起义,但未成功。1949年,宜昌解放后,他未去台湾,去了香港,后于11月份返回长沙,投奔已经起义并成解放军高级指挥员的陈明仁,被任命为兵团师级高参,后又到中南军政大学学习。1954年,尹作干被南阳地区错杀。1987年,河南省和南阳地区为其恢复了投诚人员的名誉。